番茄黄化曲叶病毒(Tomatoyellowleafcurlvirus,TYLCV)是一种严重危害番茄生产的病毒，在番茄生长的各阶段均可发生，生长发育早期的植株感病后，植株外观上无明显症状，但无法正常开花结果；生长发育后期感病植株番茄果实畸形、变小、不能正常转色，产量和商品价值大幅下降。采用本发明的试剂盒检测TYLCV，无需提取感病植株总DNA，只需采用提取缓冲液、洗涤缓冲液对少量番茄样品进行简单处理，再经一次PCR和琼脂糖凝胶电泳即可实现对番茄黄化曲叶病毒的检测鉴定。本发明的试剂盒具有简便、快速、灵敏度高、特异性强的特点，并可为TYLCV的田间调查，以及工厂化育苗的出场检测提供了可靠的技术支撑。