本发明属于生物技术领域，涉及功能性微生物多样性分析用引物和使用该引物的多重扩增，涉及功能性微生物多样性分析，用针对β-葡萄糖苷水解酶基因的引物和使用所述引物的多重扩增。本发明提供的引物具有很好的通用性和实用性，能良好的反应实验对象中参与降解纤维素的功能性微生物的多样性，适用于来源土壤，沉积物，人畜胃肠道等环境样品的分析。